RESUMO Objetivou-se com este estudo relatar a ocorrência de um caso de mastite bubalina ocasionada por Chromobacterium violaceum. Foram coletados 4,0mL de leite de cada teto mamário de uma búfala da raça Murrah. As amostras foram semeadas em ágar base enriquecido com 7% de sangue ovino desfibrinado. As leituras foram realizadas 24, 48 e 72 horas pós-incubação. Apenas o teto anterior direito apresentou crescimento de colônias de coloração violeta-escura. Microscopicamente, observaram-se bacilos Gram negativos. A confirmação da espécie foi realizada pelo sistema VITEK 2 - Compact®, sendo identificada como Chromobacterium violaceum. Essa bactéria apresentou sensibilidade a ciprofloxacina, gentamicina, sulfazotrim e tetraciclina e resistência a ceftiofur, eritromicina e penicilina G. O tratamento foi realizado com ciprofloxacina e gentamicina, apresentando resposta positiva. Estudos dessa natureza reforçam a importância desse comunicado para a sociedade, além de incentivar pesquisas contínuas e periódicas sobre sanidade da espécie bubalina, controle de qualidade que seus produtos e subprodutos estão sendo oferecidos ao mercado e conhecimento sobre infecções bacterianas raras, fortalecendo a adesão de exames microbiológicos, como lactocultura e antibiograma. Diante do exposto, registra-se a ocorrência de um caso de mastite bubalina ocasionada pela bactéria Chromobacterium violaceum.

A diversificação da produção industrial de alimentos de origem suína e o intercâmbio comercial de animais e seus derivados destinados ao consumo humano podem ser importantes disseminadores de sorovares de Salmonella spp. na cadeia alimentar. Objetivou-se avaliar em 86 cepas de Salmonella spp., isoladas em granja de terminação e no abate de suínos, a ocorrência de três genes de virulência (invA, agfA e lpfA), bem como a similaridade genética entre elas. A ocorrência do gene invA foi verificada em 100% das amostras. O gene lpfA foi detectado em 80,23% (69/86) das cepas, não foi detectado em S. Panama e estava presente em todas as cepas de S. Infantis. O gene agfA foi detectado em 63,95% (55/86) das amostras. S. Agona apresentou positividade para todos os genes de virulência estudados. A análise de homologia entre as cepas agrupou os diferentes sorovares em clusters. A similaridade foi independente do local de isolamento, o que demonstra a presença de clones ao longo da cadeia de produção e a existência de multiplicidade de fontes para a infecção dos animais, como a ração, e a contaminação cruzada das carcaças. A pesquisa de genes de virulência e a avaliação da proximidade gênica permitem a caracterização e um maior entendimento sobre cepas de Salmonella circulantes na cadeia produtiva de suínos e, assim, podem subsidiar medidas de controle durante o processo produtivo com o objetivo de garantir a saúde do consumidor.

The diversification of industrial food production of swine origin and trade of animals and their derivatives for human consumption may be important disseminators of serovars of Salmonella spp. in the food chain. This study aimed to evaluate 86 strains of Salmonella spp. isolated form in the finishing and slaughter of pigs, the occurrence of three virulence genes (invA, agfa and lpfA), as well as the genetic similarity between them. The occurrence of gene invA was observed in 100% of the samples. The gene lpfA was detected in 80.23% (69/86) strains and is not detected in S. Panama, but present in all strains of S. Infantis. The gene agfA was detected in 63.95% (55/86). S. Agona was positive for all virulence genes studied. The analysis of homology between the different serovars grouped the isolates in clusters. The similarity was regardless of the location of isolation, demonstrating the presence of clones along the production chain and that there are multiple sources for the infection of animals, such as feed, and cross-contamination of carcasses. A survey of virulence genes and evaluation of gene proximity allow characterization and better understanding of Salmonella strains circulating in the pig production chain, thus being able to support control measures during the production process in order to ensure consumer health.

Rastrearam-se a inclusão de farinha de vísceras de aves (FV) em dietas de frangos por ocasião de eventual substituição de dieta contendo FV por dieta estritamente vegetal, e vice-versa, por isótopos estáveis de carbono e de nitrogênio. Foram distribuídos aleatoriamente 192 pintos de um dia de idade, em 12 tratamentos com quatro repetições de quatro aves. Os tratamentos constituíam-se de dieta de vegetais (VG) passando para dietas contendo FV, após certa idade, ou o inverso, em que as aves começaram se alimentando de dieta FV e depois passaram para dieta VG. Aos 42 dias de idade, foram coletadas amostras de músculo peitoral (Pectoralis major), quilha e tíbia, para determinação das razões isotópicas (13C/12C e 15N/14N). A técnica dos isótopos estáveis somente não foi capaz de rastrear a utilização de FV na alimentação de frangos de corte, quando esse ingrediente fez parte da dieta das aves apenas nos primeiros sete, 14 ou 21 dias de idade. Entretanto, há a possibilidade da aplicação dessa técnica em aves mais jovens, amostradas antes de eventual mudança de dieta, pois elas podem ter a assinatura isotópica da alimentação estabilizada em torno de duas semanas de idade.

The inclusion of poultry viscera meal (VM) in broiler diets to possibly replace it with strictly vegetable diet (VE) and vice-versa, using the technique of carbon and nitrogen stable isotopes in different tissues was traced. One hundred ninety-two one-day-old chicks that had been distributed randomly were used in twelve experimental treatments with four replications of four chicks each. The treatments consisted of vegetable diet (VG) for diets containing FV going after a certain age or the reverse, in which the birds began feeding VM on diet and then switched to VE diet. At 42 days of age, samples of pectoral muscle (Pectoralis major), keel and tibia were collected, with later determination of isotopic ratios (13C/12C and 15N/14N). The stable isotopes technique couldn't trace the use of VM in feeding broilers when this ingredient was part of broiler diets only in the first seven, 14 or 21 days of age. However, this technique can be applied to younger poultry that have been sampled before a possible change in diet, since they can have the isotopic signature of feeding stabilized around two weeks of age.

Avaliaram-se os efeitos da restrição alimentar pré e pós-natal sobre o crescimento dos órgãos internos de cordeiros Santa Inês. Foram utilizados 68 cordeiros distribuídos em três tratamentos: restrição pré-natal (RPRE), restrição pós-natal (RPOS) e sem restrição (controle). Os animais foram abatidos ao nascimento e aos 10, 15, 25, 35 e 45kg de peso vivo. Após o abate, coração, pulmões, traquéia/esôfago, fígado, baço, pâncreas, rúmen/retículo, abomaso, omaso, intestino delgado e grosso foram retirados e pesados separadamente. A análise dos pesos dos órgãos internos dos animais abatidos ao nascimento demonstrou que a restrição pré-natal diminuiu os pesos do coração, pulmões, traquéia/esôfago, abomaso, pancrêas e baço, com médias de 54g, 16g, 22g, 16g, 2g e 5g, respectivamente. Aos 15kg, o peso dos órgãos dos animais submetidos à restrição pré-natal não diferiu dos demais, indicando crescimento compensatório desses órgãos já na fase de aleitamento. Não houve efeito da restrição sobre o peso médio dos órgãos da cavidade torácica, e na cavidade abdominal o rúmen, o intestino delgado e o fígado tiveram seus pesos reduzidos, com médias de 385g, 488g e 371g, respectivamente. Pulmões, traquéia e coração apresentaram crescimento heteregônico negativo (b<1); para a traquéia e o coração dos animais RPRE o comportamento foi isogônico (b=1). O rúmen e o omaso apresentaram crescimento heterogônico positivo (b>1), o abomaso heterogônico negativo (b<1), e os intestinos, o baço e o fígado, isogônico (b=1). O pâncreas dos animais controle e RPOS apresentou crescimento isogônico (b=1), e o dos RPRE heterogônico positivo (b>1). A restrição alimentar pré e pós-natal afetou o tamanho, as taxas de crescimento e o tipo de desenvolvimento de vários órgãos internos de cordeiros Santa Inês, evidenciando a necessidade de suplementação adequada para as fêmeas no terço final da gestação e para os cordeiros, durante a fase de crescimento.

The effects of pre and postnatal nutritional restriction on allometric growth of thoracic and abdominal organs of Santa Inês lambs were evaluated. Sixty-eight lambs were divided into three groups: lambs with prenatal nutritional restriction (PRER), lambs with postnatal nutritional restriction (POSR), and lambs without restriction (control). The lambs in each group were slaughted at birth, 10kg, 15kg, 25kg, 35kg, and 45kg of live weight. After slaughtering, heart, lungs, trachea and esophagus, liver, spleen, pancreas, rumen-reticulum, abomasum, omasum, and small and large intestines were individually weighted. At birth, PRER affected the weights of heart, lungs, trachea and esophagus, abomasum, pancreas, and spleen, with means of 54g, 16g, 22g, 16g, 2g, and 5g, respectively. However, the organs of the PRER lambs at 15kg of live weight showed the same weight of that organs of the others animals, indicating a compensatory growth. POSR did not affect the weight of the organs of thoracic cavity;however, in abdomen cavity, rumen, small intestine, and liver were affected, with means of 385g, 488g, and 371g, respectively. The allometric study showed that rumen and omasum presented a positive heterogonic development; while abomasum presented a negative heterogonic development; and liver, small and large intestines showed an isogonic development. The pancreas of control and POSR lambs presented an isogonic development, while pancreas of PRER lambs showed a positive heterogonic delevopment. In this experiment, the alimentary restriction affected weigth, growth, and type of development of internal organs of Santa Inês lambs, evidencing the importance of the feeding for ewes at the last third of gestation as well as for the lambs during the growth phase.

Descreve-se a remoção de cálculos vesicais por cirurgia laparoscópica em três cães utilizando-se três portais (dois de 10mm e um de 5mm) dispostos na linha média ventral e nas paredes abdominais direita e esquerda. Após a remoção das litíases, realizou-se sutura intracorpórea da parede vesical, em padrão contínuo simples, abrangendo as quatro camadas do órgão e em Lembert contínuo ou interrompido, incorporando a serosa e a muscular. Não houve complicações pós-operatórias. Um dos pacientes apresentou recidiva da doença, condição atribuída ao manejo dietético deficiente no pós-operatório. Esse paciente foi novamente submetido à cistotomia laparoscópica similar sem a ocorrência de complicações. A técnica proposta foi adequada e pode ser utilizada como alternativa para cistotomia por celiotomia no tratamento de litíases vesicais em cães.

The use of laparoscopic surgery for the removal of cystic calculi in three dogs was reported. Three trocars were used, one in the ventral midline (10mm) and the others in the right (10mm) and left (5mm) flanks. The calculi were removed and the bladder was sutured with intracorporeal technique in two layers, a simple continuous pattern and interrupted or continuous Lembert pattern. No postoperative complications were observed. One patient had a recurrence of urolithiasis, attributed to inadequate conservative treatment and to the lack of an appropriate diet. It was submitted to another similar videolaparoscopic cystotomy without complication. The proposed technique is appropriate and an alternative to conventional cystotomy for treatment of canine vesical urolithiasis.

A total of 72 strains of Staphylococcus aureus were examined for the production of staphylococcal enterotoxins (SE) A, B, C, D and toxic shock syndrome toxin (TSST-1). The strains were isolated from milk samples from cows with mastitis in dairy herds of São Paulo State, Brazil. Off 72 isolates, 38 (52.8%) produced SEA, 38 (52.8%) SEB, 32 (44.4%) SED, 28 (38.9%) SEC and 27 (37.5%) TSST-1. From the 72 strains, 66 (91.7%) produced, at least, one or more toxin, including TSST-1.

RESUMO Este trabalho teve por objetivo conhecer a sensibilidade antimicrobiana “in vitro” de 72 cepas de Staphylococcus aureus isoladas em amostras de leite de vacas com mastite clínica e subclínica, em 10 propriedades rurais do Estado de São Paulo. Os testes foram realizados pela da técnica de difusão em discos padronizada por Kirby-Bauer. Os principios ativos que apresentaram maior sensibilidade foram a gentamicina (98,6%) e a eritromicina (98,6%), seguidos pela estreptomicina (94,4%), oxacilina (84,7%), novobiocina (73,4%), vancomicina (72,2%), ampicilina (4,2%) e a penicilina (2,8%). Os resultados obtidos evidenciaram, ainda, que as 72 (100%) cepas estudadas apresentaram resistência a pelo menos 2 antibióticos ou quimioterápicos e que nenhum destes princípios ativos, agindo isoladamente, pode ser ativo contra qualquer das cepas experimentadas.

ABSTRACT The purpose of this study was to determine the in-vitro susceptibility pattern of 72 Staphylococcus aureus strains, isolated from bovine mastitic milk. The calves were reared on 10 dairy farms in the state of São Paulo, Brazil. These strains were tested by the standardized disc diffusion method. The highest susceptibility was to gentamicin (98.6%) and erytromycin (98.6%), followed by streptomycin (94.4%), oxacillin (84.7%), novobiocin (73.4%), vancomycin (72.2%), ampicillin (4.2%) and penicillin (2.8%). Results showed that 72 (100%) strains were resistant to at least 2 antibiotics and chemotherapeutics. None of the active principles, acting alone, was effective against any of the strains tested.

To investigate the role of nitric oxide in human sepsis, ten patients with severe septic shock requiring vasoactive drug therapy and mechanical ventilation were enrolled in a prospective, open, non-randomized clinical trial to study the acute effects of methylene blue, an inhibitor of guanylate cyclase. Hemodynamic and metabolic variables were measured before and 20, 40, 60, and 120 min after the start of a 1-h intravenous infusion of 4 mg/kg of methylene blue. Methylene blue administration caused a progressive increase in mean arterial pressure (60 [55-70] to 70 [65-100] mmHg, median [25-75th percentiles]; P<0.05), systemic vascular resistance index (649 [479-1084] to 1066 [585-1356] dyne s-1 cm-5 m-2; P<0.05) and the left ventricular stroke work index (35 [27-47] to 38 [32-56] g m-1 m-2; P<0.05) from baseline to 60 min. The pulmonary vascular resistance index increased from 150 [83-207] to 186 [121-367] dyne s-1 cm-5 m-2 after 20 min (P<0.05). Mixed venous saturation decreased from 65 [56-76] to 63 [55-69]% (P<0.05) after 60 min. The PaO2/FiO2 ratio decreased from 168 [131-215] to 132 [109-156] mmHg (P<0.05) after 40 min. Arterial lactate concentration decreased from 5.1 ± 2.9 to 4.5 ± 2.1 mmol/l, mean ± SD (P<0.05) after 60 min. Heart rate, cardiac filling pressures, cardiac output, oxygen delivery and consumption did not change. Methylene blue administration was safe and no adverse effect was observed. In severe human septic shock, a short infusion of methylene blue increases systemic vascular resistance and may improve myocardial function. Although there was a reduction in blood lactate concentration, this was not explained by an improvement in tissue oxygenation, since overall oxygen availability did not change. However, there was a significant increase in pulmonary vascular tone and a deterioration in gas exchange. Further studies are needed to demonstrate if nitric oxide blockade with methylene blue can be safe for patients with septic shock and, particularly, if it has an effect on pulmonary function.

Realizou-se o isolamento e cultivo de protolastos de porta-enxertos de citros das variedades limoeiro Cravo e tangerina Cleópatra. Utilizou-se solução enzimática para a digestão da parede celular de células em suspensão (7 a 10 subcultivos em meio de cultura MT) e procedeu-se a purificação criteriosa. O plaqueamento dos protoplastos foi realizado em meio de cultivo KM8p e na molaridade de 0.6 M, sob condições de escuro a 28 ± 1°C, após ajuste para a densidade de 2 x 10s ppts/mL A redução da pressão osmótica do meio de cultivo foi realizada a cada 10 dias na seguinte proporção de meio de cultura KM8p 0.6 M e KM8 (2:1, 1:1, 1:2, 0:3). Com relação aos resultados, obteve-se em média o isolamento de 0.7 x 10(6) ppts / ml de suspensões celulares de tangerina Cleópatra e 0.5 x 1O6 ppts / ml de suspensões de limoeiro Cravo, com uma porcentagem de viabilidade de 86 a 92% para a variedade Cleópatra e de 73 a 80% para o limoeiro Cravo. As divisões celulares começaram a ocorrer por volta do 8° dia após o plaqueamento, sendo obtida uma eficiência inicial de plaqueamento de 9% para a variedade Cleópatra e de 5% para o limoeiro Cravo. Aos 50 dias de cultivo, as colônias foram transferidas para meio semi-sólido MT, onde apresentaram ritmo acelerado de crescimento formando calos.

Protoplast isolation and growth of Citrus rootstock v. Cravo lime and Cleópatra mandarin were carried out Enzyme mixture was used to digest cell suspensions 7-10 times, following criterious purification. Protoplast culture was carried out in doplets of semi-solid (agarose 0.6% p/v) KM8p medium, in the dark, at 28 ± 1°C following density adjustment to 2 x 10(5) ppts/ml. Osmotic pressure reduction was acomplished for each growth every 10 days with a mixture in equal volumes of KM8p and KM8 medium in ratios of 2:1; 1:1; 1:2 e 0:3. Isolation produced 0.7 x 10(6) ppts/ml for Cleópatra mandarin and 0.5 x 10(6) ppts/ml for Cravo lime, with a viability between 86 to 92% and 73 to 80%, respectively. First cell divisions were recorded at the 8th. day of growth, with an inicial platting efficiency of 9% for Cleópatra mandarin and 5% for Cravo lime. Callus development was achived in 50 days upon transfer of microcalus to semi-solid MT medium.

A hibridação somática via fusão de protoplastos vem sendo utilizada no melhoramento de porta-enxertos de citros em diversos países. Nos Estados Unidos, vários estudos demonstram a eficiência de procedimentos no isolamento e cultivo de protoplastos dessa frutífera. O presente trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar o efeito do meio de cultivo de calos embriogênicos do porta-enxerto tangerina Cleópatra (Citrus reshni Hort.) sobre o isolamento de protoplastos, bem como sugerir alterações de procedimento. Os resultados mostram a possibilidade do isolamento de 1.4 x 10(6) a 4.7 x 10(6) protoplastos por grama de calos da espécie estudada. Verificou-se que, o subcultivo dos calos de tangerina Cleópatra em meio de cultura, sem reguladores 1 hora, sob condições de escuro a 120 rpm, proporcionou maior eficiência de isolamento de protoplastos (4.7 x 10(6) protoplastos/g de calo).

Somatic hybridization has been used for citrus rootstock breeding in many countries. In USA, many reports had proved the efficiency of procedures for the isolation and culture of citrus protoplasts. This research was conducted to evaluate the efficiency of procedures of protoplast isolation using embryogenic callus of the Cleópatra mandarin rootstock. Alterations were proposed to increase protoplast isolation and culture method. Results show the possibility of a protoplast yield of 1.4 to 4.7 x 10(6) pps/g.f.w. for Cleópatra tangerine rootstock callus. Protoplast yield can be raised to 4.7 x 10(6) pps/g.f.w. if the embryogenic callus are grown in a medium supplemented only with 4% sucrose and pre-treated with 1% w/v macerozyme for 1 hour, at 120 rpm, in dark, is applied before protoplast isolation.

A utilização de bandejas de isopor na produção de mudas de hortaliças e frutíferas vem aumentando em nosso pais, devido às vantagens que esse método apresenta: economia de substrato e de área de viveiro, menor custo no controle de pragas e doenças, produção de mudas de alta qualidade e alto índice de pegamento após o transplante. No caso do maracujazeiro (Passiflora edulis var. flavicarpa), o transplante de mudas é uma prática bastante utilizada para sua propagação. A ocorrência de traumatismos na raiz durante esta fase é significativa, influindo negativamente no desenvolvimento posterior das mudas. O presente trabalho objetivou avaliar a produção de mudas de maracujá em bandejas de isopor, comparando a eficiência de quatro substratos diferentes e dois tipos de bandejas na germinação e desenvolvimento das mudas. Conclui-se que o método de produção de mudas de maracujazeiro em bandejas é eficiente, resultando em mudas de alta qualidade, com elevada porcentagem de pegamento. Verificou-se também que na bandeja de 72 células e nos substratos Plantmax e substrato III (areia: vermiculita: estéreo; 1:1:1, suplementado com 10 Kg/m³ de superfosfato simples, 6 Kg/m³ de cloreto de potássio, 2 Kg/m³ de uréia e 8 Kg/m³ de calcário houve maior porcentagem de germinação e adequado desenvolvimento das mudas.

This paper describes the use of two types of styrofoam trays and four different substrates. The efficiency of different substrates and tray types in passionflora (Passiflora edulis var.flavicarpa) seed germination and seedling growth were analysed. The results indicated that both tray types tested are adequate for passionflora germination and seedling growth. Nevertheless the 72 cell tray type had a statistically better performance than the 128 ceU tray type. Substrate III (sand; vermiculite; dung; 1:1:1, supplemented with 10 Kg/m³ simple superphosphate, 6 Kg/m³ potassium chloride, 2 Kg/m³ urea and 8 Kg/m³ Ume) and substrate Plantmax were used in the cells. Both substrates had a superior performance in relation to substrates number I and II.